2022细胞生物学实验原理复习资料汇总

2022细胞生物学实验原理复习资料汇总

• 1.2022年考试复习题及参考答案
• 2.2021年考试复习题及参考答案
• 3.2020年之前考试复习题汇总
• 4.复习重点（汇总）
• 5.排版好的PDF高清版 获取途径（资源2021年版，链接2022年最新版本）

1.2022年考试复习题及参考答案

1. 请给出转染的定义，并写出至少 3 种转染的方法及原理
   转染(transfection)：指将外源分子如 DNA，RNA 等导入真核细胞的技术
   （1）化学介导：1973 年 Graham 和 Eb 在磷酸钙的存在下通过病毒 DNA 转化哺乳动物，
   开启了基因在细胞中瞬时表达的大门。
   （2）电穿孔法：通过高强度的电场作用，瞬时提高细胞膜的通透性，从而吸收周围介质中的
   外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与 RNA、蛋白类、染料及病毒颗粒等导入原核和
   真核细胞内。
   （3）慢病毒 Lentivirus 转染：慢病毒感染宿主细胞时，可以将携带的外源基因随机、稳定
   地整合入宿主细胞基因组中，实现目的基因稳定、长期的表达，非常适合于基因过表达稳定细
   胞株的建立
2. 如何采用一种染色方法就可以区分正常细胞、细胞凋亡（早期、中晚期）及细胞坏死br> 答：Annexin V/PI 染色
   （1）Annexin V 是一种 Ca2+依赖的磷脂结合蛋白，而在凋亡细胞早期 凋亡细胞的细胞膜
   表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使 PS 暴露在细胞膜外表
   面。Annexin V 具有易于结合到磷脂类如 PS 的特性。
   （2）碘化丙啶(propidine iodide,PI)是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在凋
   亡中晚期的细胞和死细胞，PI 能够透过细胞膜而使细胞核红染。
   因此将 Annexin-V 与 PI 匹配使用，就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来：
   （3）活细胞不能被 Annexin V-FITC 或 PI 染色
   （4）早期凋亡细胞因磷脂酰丝氨酸的暴露及具有完整细胞膜，故 Annexin V-FITC 染色阳性
   及 PI 染色阴性
   （5）坏死或晚期凋亡的细胞呈 Annexin V-FITC 及 PI 染色双阳性。
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   3.蛋白质磷酸化是指由蛋白质激酶催化的把 ATP 的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基（丝
   氨酸、苏氨酸、酪氨酸）上的过程，是生物体内一种普通的调节方式，在细胞信 转导的过
   程中起重要作用，请问蛋白的磷酸化如何检测br> （1）使用特异性抗磷酸化蛋白抗体（p-Thr、p-Ser 和 p-Tyr ）结合 Western blot
   免疫组化和免疫荧光进行检测
   （2）流式细胞术
   （3）质谱分析法，如采用高通量磷酸化修饰组学筛选激酶的底物蛋白
   （4）放射性核素 32P 同位素放射性标记法：用 32P 同位素放射性标记磷酸盐作为磷酸基团
   供体，经过磷酸化酶促反应，带有 32P 同位素放射性标记的磷酸基团则转移到相应的反应蛋
   白上，通过凝胶电泳分离，可以用放射自显影或磷光成像仪检测磷酸化蛋白质。
   （5）激酶活性测定：蛋白激酶与磷酸酶抑制剂的应用
3. 流式细胞术中的前向散射光(forward scatter, FSC)、侧向散射光（side scatter, SSC)
   的意义，为什么要进行设门法br> （1）相对大小 前向散射光(forward scatter, FSC)：
   （2）相对颗粒度密度等内部结构属性 侧向散射光（side scatter, SSC)
   （3）FCM 设门法：用门选择某一或某 用门选择某 或某些特性（荧光特性或散射光特性）
   的细胞 对门内的细 细胞，对门内的细胞群体作进一步的分析 它是定性细 分析，它是定性细
   胞亚群的重要方法
   5.解释什么是干细胞的不对称分裂分化特征分，干细胞分为哪 3 类给出一个例子
   干细胞的不对称分裂：
   （1）干细胞一方面进行自我更新（self renew)，产生与亲本完全相同的子代细胞，以保持
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   干细胞数量的恒定；
   （2）另一方面在一定条件下可以进入分化程序，通过不对称分裂产生分化的子代细胞，最终
   形成功能特异的组织类型，在组织修复和新陈代谢中起重要作用。
   按照分化特征分：
   （1）全能干细胞(Totipotent stem cell)具有形成完整个体的分化潜能，如受精卵
   （2）多能干细胞(pluripotent stem cell)具有分化出多种细胞组织的潜能，如造血干
   细胞、神经干细胞。
   （3）单能干细胞(multipotent stem cell)只能向一种或两种密切相关的细胞类型分化，
   如神经元干细胞只能分化成神经元。
4. 什么是假设检验的两类错误加样本量可能会对会对统计分析结果产生什么样的影响br> （1）2 类错误是相对 假设检验时提出原假设和备择假设：
   第一类错误（Ⅰ类错误）也称为 α错误，是指当虚无假设(H0)正确时，而拒绝 H0 所犯的错
   误。这意味着研究者的结论并不正确，即观察到了实际上并不存在的处理效应 弃真
   第二类错误（Ⅱ类错误）也称为β错误，是指虚无假设错误时，反而接受虚无假设的情况，即
   没有观察到存在的处理效应。取伪
   （2）增大样本量的影响：
   1.增大样本量可以使两类错误降低：如果扩大了样本容量，那么抽样得到的值越接近于真实水
   平，那么如果原假设是成立的，这个抽样算出来的值（接近真实的值）很大程度上不会出现在
   拒绝域，因而减小了弃真误差。取伪误差同理。但在样本容量确定的情况下，α与β不能同时
   增加或减少。
   2.增加样本含量可以缩小变异系数，更接近真实情况，科学价值更高。

3.2020年之前考试复习题汇总

5.排版好的PDF高清版 获取途径（资源2021年版，链接2022年最新版本）

（1）资源2021年版，同步更新，2022年版暂未获权

（2）如需 2022年最新版链接，在某宝和咸yu有链接，搜索 CSDN电饭煲 即可

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