如何用PEAKS Studio查看质谱搜库结果

PEAKS是由加拿大BSI公司开发的基于bottom up技术路线的蛋白质组学质谱数据的一站式软件分析平台。其中行业标准的蛋白质从头测序de novo算法，广泛应用于蛋白质组学、抗体药物的研究。

PEAKS Studio 能够完整地进行从数据转化到蛋白鉴定及定量，翻译后修饰及序列突变，最终进行结果验证、可视化以及 告的分析流程。包括de novo sequencing、PEAKS DB、PTM、SPIDER 、inChorus 、PEAKS Q。本主要描述如何通过PEAKS Studio查看搜索结果，得到更具体的谱图信息。

一、下载及安装软件

软件官

下载后，按默认参数，直接下一步安装。

安装完成后，找到软件打开

二、打开搜库文件结果

1、因为是商业化软件需要激活码，打开软件后，我们选择查看模式查看数据即可。

软件界面

2、打开搜库工程文件

A:选择打开

B:找到搜库路径，选择文件夹，打开

3、查看 de novo多肽部分结果（基于软件从头测序部分结果）

A:双击de novo多肽部分结果，打开

B:多肽总结部分

包括搜索参数、及多肽统计部分内容

C:DE NOVO多肽

可以根据质谱SCAN 对质谱谱图进行查看

放大感兴趣多肽二级谱图查看，可以直接截图

4、查看 PEAKS结果（基于蛋白数据库搜索结果）

A:双击PEAKS打开

第一项的为质量控制 告，内容包括错误发现率（FDR）曲线、PSM 分数分布、肽特征检测的分布、鉴定的肽特征的分布。（如需了解每个图代表含义，可以联系小编，获取“蛋白结果鉴定结果说明.pdf”。

B:蛋白项

在蛋白鉴定列表，显示的为鉴定到的蛋白。整个蛋白序列呈现在软件界面内。序列的下划线表示质谱鉴定的到的多肽、蓝色线表示搜索鉴定到的结果，修饰的结果也显示在搜索结果上。最靠近序列的蓝色线为可信度更高的匹配结果。灰色下划线为DE NOVO匹配的多肽。

C:多肽项

多肽呈现的界面与De novo结果类似。

5、软件导出结果表头说明

Table 1 .数据统计

# of MS scans

质谱采集到的一级图谱数量

# of MS/MS scans

质谱采集到的二级图谱数量

# of Features

数据库匹配的关联扫描的肽特征的总数

# of Chimera scans

数据库匹配的关联扫描 Chimera scans 的总数

Table 2. 结果过滤参数

Peptide -10lgP

过滤掉小于设置的肽段筛选阈值的多肽

Protein -10lgP

过滤掉小于设置的蛋白筛选阈值蛋白

Proteins unique peptides

过滤掉小于设置的 unique 多肽匹配数的蛋白

De novo ALC Score

过滤掉小于设置的肽段筛选阈值的多肽

Table 3. 过滤后的结果统计

Peptide-Spectrum Matches

匹配上肽段的图谱数量

Peptide sequences

匹配上的肽段数量

Protein groups

匹配上的蛋白质种类数量

Proteins

匹配上的蛋白质数量

Proteins (#Unique Peptides)

匹配上不同数目 Unique Peptides 的蛋白质数量

FDR (Peptide-Spectrum Matches)

PSM 的假阳性率

FDR (Peptide Sequences)

多肽的假阳性率

FDR (Protein)

蛋白的假阳性率

De Novo Only Spectra

仅用 De Novo 分析出多肽序列的图谱数量

# of Identified Features

在给定为搜索结果设置的过滤器的情况下，具有与数据库匹配的关联扫描的肽特征的总数。

# of Identified MS/MS scans

在给定为搜索结果设置的过滤器的情况下，与数据库匹配的 MS / MS扫描总数

Table 4. 蛋白质修饰位点文件

Name

修饰名称

?Mass

修饰后，肽段增加的质量数

Position

修饰发生的位点

#PSM

发生该修饰的匹配上肽段的图谱数量

-10lgP

修饰的可信度评分

Area

肽段结果对应 MS2 谱峰所在肽段 TIC 峰面积

AScore

用于计算修饰位点置信度，一般高于 13 认为可信度高

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