”生信修炼手册”!
随着高通量测序在lncRNA研究领域的应用, 越来越多的lncRNA被发现。对于转录组测序的数据而言,组装得到转录本之后,首先要做的就是区分蛋白编码和非蛋白编码的RNA。
目前针对这一问题,有多种解决方案,基本可以分为以下两类
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alignment-based
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alignment-free
第一种算法基于序列比对,可以较好的识别保守性较好的蛋白编码基因, 包括,等软件; 第二种算法不需要比对,而是通过coding和non-coding转录本的序列特征来进行区分,包括, , 等。
lncRNA在物种间的保守性较差,另外部分lncRNA的染色体位置和蛋白编码基因存在重叠,通过序列比对的方式来区分容易造成误判。除此之外,基于序列比对的软件,其运行速度相对较慢,所以采用第二种算法的软件综合效果更好。
http://lilab.research.bcm.edu/cpat/
对于一个转录本而言,它是coding还是noncoding, 本质上是一个二分类问题,所以的开发者想到了通过逻辑回归来解决这个问题。该软件基于以下四个特征构建了逻辑回归模型来区分coding和noncoding
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open reading frame size
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open reading frame coverage
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Fickett TESTCODE statistic
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hexamer usage bias
前两个因素都是针对开放阅读框定义的,第一个因素是开放阅读框的大小,第二个因素是开放阅读框占转录本总长度的比例,第三个因素基于序列的碱基组成和密码子分布进行定义,第四个因素基于序列中六聚体的频率进行定义。
在论文中,针对以上4种特征,首先评估在coding和noncoding中的分布,图示如下
可以看到和的效果是最好的。基于python编程语言开发,安装非常的简便,代码如下
该软件既可以在本地运行,也提供了在线版本。
1. 在线版本
在线版本的 址如下
http://lilab.research.bcm.edu/cpat/
可以直接输入fasta格式的序列,也可以输入bed格式的文件,此时需要指定对应的基因组版本,示意如下
最后一列给出了转录本的蛋白编码信息,代表该转录本为protein-coding转录本,代表该转录本为noncoding转录本。
·end·
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