欣软行为学：大鼠静脉自身给药颈静脉插管手术方法

大鼠静脉自身给药颈静脉插管手术方法

大鼠自主给药实验( rat self-administration)是建立大鼠成瘾模型最常用的一种方法，也是临床前依赖性评价中检测新药是否具有依赖性潜力的金标准。大鼠自主给药实验通过颈静脉插管手术，建立了将可获得的药物直接与颈静脉相连通的静脉注射模型，动物通过主动按压踏板或者鼻触，获得从颈静脉输入的药物，如若该药物具有成瘾性，则动物就会维持其踏板或者鼻触行为，从而形成稳定的自主给药行为，反映药物的强化作用。

自主给药实验时长都会长达几周甚至数月之久，如若插管不在静脉内或者发生堵管、漏液等问题，就导致药物无法正常输入静脉，进而造成实验的终止，所以颈静脉插管手术是该实验最基本也是最关键的技术，而插管设计的合理性直接决定了插管鼠的可用寿命。现有用于自主给药的插管产品主要分为两种:一种为马甲束缚式插管，另一种为无束缚式插管。

束缚式插管通过给大鼠穿戴马甲的办法固定体内插管，操作较为简单，但插管破坏率较高，实验成本也较高。

无束缚式插管通过巧妙的多材料组合设计，将插管组件埋入动物背部皮下，解决了马甲束缚式插管的缺点，但现有产品仍然存在着如下缺点:生物相容性较差，容易造成伤口感染，且埋入动物皮下部分不能与皮下组织良好嵌合，对动物产生较大的异物感，影响动物情绪，进而影响自主给药行为等缺点。

（马甲束缚式插管）

（无束缚式插管）

插管组件制作

(1)制作材料

如图1所示a图，制作材料有:硅胶管(内径0. 5 mm，外径0. 9 mm)、23G不锈钢导管(长度24 mm)、M4螺纹尼龙固定底座(包含一个垂直的螺柱和一个水平的具有侧方开口的圆形底座)、圆形聚丙烯垫片(直径25 mm)、一端封闭的硅胶帽(长约5 mm，内径0. 5 mm，外径2 mm)、M4螺纹尼龙帽(内螺纹与M4螺纹尼龙固定底座匹配)、二甲苯、生物相容性良好的瞬干胶Apollo 2240及其催化剂。

(2)制作流程

1)将不锈钢导管小心套入长硅胶管(长约13 cm)中，大约套至不锈钢导管的一半处，然后将两个长约2 mm硅胶结点用镊子辅助套入长硅胶管远离不锈钢导管端的3. 5 cm处和5. 5 cm处，分别称作第一结点和第二结点;然后用二甲苯将短硅胶管(长约3 cm)浸泡几分钟，待管子膨胀后将其套入不锈钢导管，将不锈钢导管上的长硅胶管覆盖，起到了保护和加固长硅胶管的作用;待二甲苯挥发完全后，用镊子将不锈钢导管一端0. 5 mm处弯折90°弯折的时候一定要轻柔，防止导管损坏。将该组合称为组合A。

2)将组合A的不锈钢导管插入固定底座中，不锈钢导管弯折端位于其侧方开口处，而露出螺柱的不锈钢导管约为5 mm。将该组合称为组合B。3)将组合B的水平底座部分与聚丙烯垫片的中央位置用瞬干胶粘合，同时涂布少量瞬干胶于将要埋植于皮下的部分(因该固定底座无生物相容性，故用胶水覆盖降低动物不适度)，并用瞬干胶催化剂加速固化，放置至少24 h后，套上具有保护作用的硅胶帽和尼龙帽，紫外消毒后，便得到了插管组件，如图1所示b图。

弹簧保护套管制作流程

( 1)材料准备

保护弹簧:长305 mm，外径3 mm，内径2 mm，用以保护内部输液导管不被动物破坏;可拆卸的双通道轴承接口;输液导管:长350 mm，内径0. 35 mm，外径0. 8 mm的硅胶管; M4螺纹尼龙帽(与插管组件中的尼龙帽规格一致) ;热熔胶。如图1所 示c图。

( 2)制作流程将保护弹簧一端的外围涂布少量热熔胶，然后将尼龙帽的一端套在热熔胶上，使尼龙帽与保护弹簧重叠长度约5 mm，待其固化后，将轴承接口的其中一个孔道与保护弹簧的另一端(远离尼龙帽端)对接固定，然后将输液导管穿引到保护弹簧中即得弹簧保护套管，将该弹簧保护套管与自主给药实验箱的平衡臂连接即得输液系统，如图1所示d图，输液系统与注射泵连接。当给药时，将插管组件的尼龙帽和硅胶帽去除，与弹簧保护套管上的输液导管和尼龙帽连接即可给药。

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